酵母文库类似于一个储存大量外源基因片段的仓库，利用酵母细胞作为载体，将外源基因片段插入到酵母菌内，形成一个包含大量基因片段的集合。酵母文库可以用于研究基因的功能、表达、互作等各个方面，是生物学研究中的重要工具之一。当把我们研究的目标基因成功构建到载体上，并成功构建酵母文库，可以便捷得用于包括筛库等各项后续实验。
通过酵母文库技术，可以构建全基因组的蛋白质互作网络，分析蛋白质的结构、功能、调控和演化，发现新的蛋白质和信号通路。如酵母双杂是利用酵母文库研究蛋白质互作的经典策略。
利用酵母文库进行蛋白组学、基因组学等研究，不仅更加经济便捷，而且作为经典思路被广泛认可。
酵母菌作为一种真菌，在生物技术实验上发挥了巨大作用，酵母文库的构建方法，目前比较主流的包括SMART和Gateway两种，两种技术适用于不同的条件和需求。
SMART技术是由Clontech于1996年开发的，SMART技术的名称来源于switching mechanism at 5’ end of RNA template的缩写，最初用于构建哺乳动物cDNA文库，后来也用于构建酵母cDNA文库。SMART技术的原理是利用反转录酶的模板切换活性，将特异性的序列加到cDNA的5’端，从而提高全长克隆的效率。
Gateway技术是由Invitrogen于1999年开发的，最初用于构建无限制性酶切位点的克隆载体，后来也用于构建酵母文库。Gateway技术的原理是利用细菌噬菌体λ的重组系统，将特异性的重组序列加到DNA片段的两端，从而实现不同载体间的DNA转移。
SMART和Gateway实验步骤对比
建库材料选择
酵母文库构建的材料可以选择植物组织、动物组织/细胞、菌液或完成提取未降解的RNA。
提取的RNA经琼脂糖凝胶电泳应能清晰看到28S和18S两条带；经分光光度仪检测，OD260/OD280应在1.8-2.2之间，OD260/OD230应大于2。
SMART和Gateway技术对比
SMART技术和Gateway技术都是酵母文库构建的有效方法，但是它们各有适用的条件和需求。一般来说，如果起始RNA量少，或者需要富集低丰度表达基因，或者需要包含5’非翻译区的序列，可以选择SMART技术；如果起始RNA量多，或者需要在不同的表达载体间进行DNA转移，也可以选择Gateway技术。
当然，科研过程中，并不是越复杂的实验操作带来的结果就更加真实可靠，相反，过于复杂繁琐的操作更容易造成移码等不好的结果。尽管Gateway法的初级文库经过扩繁理论上可以进行无限次使用，但随着时间的推移，菌液质量下降可能会对实验结果造成影响。
相比于Gateway法，SMART法有着更简便的实验操作，需要更低的RNA起始量，经过均一化操作有效富集低丰度表达基因，降低冗余序列比例，同时，SMART法能合成完整的包括5‘非翻译区的基因信息，提高全长克隆的比例。
