Tumor-suppressive miR-4732-3p is sorted into fucosylated exosome by hnRNPK to avoid the inhibition of lung cancer progression肿瘤抑制性的miR-4732-3p通过hnRNPK分类为岩藻糖基外泌体，以避免对肺癌进展的抑制
背景：在癌症细胞中观察到的异常岩藻糖基化有助于增加岩藻糖基化外泌体向血液中的释放，其中包括miR-4732-3p在内的miRNA有望在我们的初步研究中成为潜在的肿瘤生物标志物。然而，在肺癌进展过程中，miR-4732-3p分类为岩藻糖基外泌体的潜在机制仍不清楚。
方法：利用基于小扁豆凝集素磁珠的岩藻糖捕获策略分离岩藻糖基化外泌体，并使用纳米粒子追踪分析（NTA）评估捕获肿瘤来源外泌体的效率。采用荧光原位杂交（FISH）和qRT-PCR方法测定非小细胞肺癌（NSCLC）组织中miR-4732-3p的水平。建立了一个共培养系统来评估miRNA通过外泌体从NSCLC细胞中的释放。应用RNA免疫沉淀（RIP）和miRNA下拉来验证miR-4732-3p与异质核核糖核蛋白K（hnRNPK）蛋白之间的相互作用。应用细胞功能测定、细胞衍生异种移植物、双荧光素酶报告实验和蛋白质印迹来检测miR-4732-3p对MFSD12及其下游信号通路的影响，以及hnRNPK对NSCLC的影响。
结果：我们使用岩藻糖捕获策略富集了来自NSCLC细胞的外泌体，并检测到血清中岩藻糖基化外泌体中miR-4732-3p的显著上调，而其在NSCLC组织中的表达下降。miR-4732-3p通过靶向MFSD12的3'UTR，在NSCLC中起到抑癌作用，从而抑制AKT/p21信号通路，诱导细胞周期阻滞在G2/M期。非小细胞肺癌细胞优先通过外泌体释放miR-4732-3p，而不是将其保留在细胞内，这是由miR-4732-3p与hnRNPK蛋白的相互作用促进的，用于选择性分选成岩藻糖基化的外泌体。此外，hnRNPK的敲除抑制了NSCLC细胞的增殖，NSCLC组织中miR-4732-3p水平升高，但血清岩藻糖基化外泌体中的表达降低。
结论：非小细胞肺癌细胞通过hnRNPK介导的将miR-4732-3p分选为岩藻糖基化外泌体来逃避miR-4732-3p的抑制作用，从而支持细胞的恶性特性并促进非小细胞癌的进展。我们的研究为非小细胞肺癌提供了一种有前景的生物标志物，并通过靶向hnRNPK来防止肿瘤抑制性miR-4732-3p从非小细胞癌细胞中“外泌体逃逸”，为非小细胞肺癌治疗开辟了一条新途径。
其中外泌体转染用Entranster-H4000产品转染实现。
