HPLC分类及其原理

HPLC分类有很多种,可以根据不同的依据进行分类。

1. 根据流动相和固定相的极性不同,HPLC可以分为正相色谱和反相色谱。

正相高效液相色谱:色谱柱中的固定相是由硅胶、氧化铝等极性化合物组成。当色谱运行时,由于样品中的极性化合物对固定相有较强的亲和力,使它们在色谱柱中的保留时间比非极性化合物长,因此非极性化合物最先被洗脱出来。许多物质都可以用正相色谱法分析,但由于药物、食物和其他生物制品大都是非极性的,所以在日常生活中应用不如反向色谱法广泛。

反相高效液相色谱:固定相由非极性化合物组成,如十八烷基硅烷、C18、C8等有机化合物。流动相是极性的。因此,极性高的化合物最先被洗脱,低极性或无极性的化合物最后洗脱。

HPLC大都是对药物、食品、生化分子等物质进行分析,而它们在自然界中都是极性物质(水溶性)。因此,反相高效液相色谱应用更为广泛。

2. 根据分离原理的不同,HPLC可分为以下六种。

亲和色谱:主要利用样品与固定性之间的亲和性,实现分离。

离子交换色谱:基于固定相与流动相的带电基团发生可逆交换,达到分离目的。离子交换树脂用于分离含有带电离子的样品。对于阴离子,使用阴离子交换树脂;对于阳离子,使用阳离子交换树脂。主要用于分离酸性和碱性化合物。

离子对色谱:在反相色谱的流动相或固定相中加入离子配对剂,与样品中可电离的成分形成“对离子”。常用的离子配对剂有戊烷、己烷、庚烷或辛烷磺酸盐等。

吸附色谱:是利用吸附性不同的原理,根据样品中的组分对固定相的亲和力不同而发生分离。

空间排阻色谱:按样品中的组分的分子大小顺序进行分离。色谱柱是由琼脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺等软凝胶制成,也可用烷基葡聚糖、聚苯乙烯等半刚性凝胶。

手性色谱:用于分离样品中的光学活性异构体。固定相采用化学键合硅胶。常应用于医药、生物等领域。

3. 根据分析目的不同,HPLC可以分为分析型液相色谱和制备型液相色谱。

分析型液相色谱:主要利用检测器对混合物中各组分进行定性和定量分析。

制备型液相色谱:主要是对混合物中各组分进行分离纯化。制备型的色谱柱和进样量都比分析型大。

4. 正如大家所知道的,混合物的分离是由于流动相流过HPLC色谱柱完成的,其中流动相可以是单一的溶剂,也可以是混合溶剂,因此HPLC可以分为等度洗脱和梯度洗脱两种类型。

等度洗脱:只有一种溶剂,所有的操作都是在一种溶剂下进行的。

梯度洗脱:流动相由两种或两种以上的溶剂组成,并不断改变其浓度配比。

迪信泰检测平台以液相/气相为依托,组建国际领先的HPLC、LC-MS、GC-MS等检测平台,为广大科研工作者提供高质量、快速、精准的一站式检测服务,涉及生物、食品、药物、化妆品、环境等多领域。

参考资料:Types Of HPLC | Their Principle And Application

本文由迪信泰检测平台(Biotech-Pack-Analytical整理编辑。未经允许,不得转载

©著作权归作者所有,转载或内容合作请联系作者
  • 序言:七十年代末,一起剥皮案震惊了整个滨河市,随后出现的几起案子,更是在滨河造成了极大的恐慌,老刑警刘岩,带你破解...
    沈念sama阅读 218,122评论 6 505
  • 序言:滨河连续发生了三起死亡事件,死亡现场离奇诡异,居然都是意外死亡,警方通过查阅死者的电脑和手机,发现死者居然都...
    沈念sama阅读 93,070评论 3 395
  • 文/潘晓璐 我一进店门,熙熙楼的掌柜王于贵愁眉苦脸地迎上来,“玉大人,你说我怎么就摊上这事。” “怎么了?”我有些...
    开封第一讲书人阅读 164,491评论 0 354
  • 文/不坏的土叔 我叫张陵,是天一观的道长。 经常有香客问我,道长,这世上最难降的妖魔是什么? 我笑而不...
    开封第一讲书人阅读 58,636评论 1 293
  • 正文 为了忘掉前任,我火速办了婚礼,结果婚礼上,老公的妹妹穿的比我还像新娘。我一直安慰自己,他们只是感情好,可当我...
    茶点故事阅读 67,676评论 6 392
  • 文/花漫 我一把揭开白布。 她就那样静静地躺着,像睡着了一般。 火红的嫁衣衬着肌肤如雪。 梳的纹丝不乱的头发上,一...
    开封第一讲书人阅读 51,541评论 1 305
  • 那天,我揣着相机与录音,去河边找鬼。 笑死,一个胖子当着我的面吹牛,可吹牛的内容都是我干的。 我是一名探鬼主播,决...
    沈念sama阅读 40,292评论 3 418
  • 文/苍兰香墨 我猛地睁开眼,长吁一口气:“原来是场噩梦啊……” “哼!你这毒妇竟也来了?” 一声冷哼从身侧响起,我...
    开封第一讲书人阅读 39,211评论 0 276
  • 序言:老挝万荣一对情侣失踪,失踪者是张志新(化名)和其女友刘颖,没想到半个月后,有当地人在树林里发现了一具尸体,经...
    沈念sama阅读 45,655评论 1 314
  • 正文 独居荒郊野岭守林人离奇死亡,尸身上长有42处带血的脓包…… 初始之章·张勋 以下内容为张勋视角 年9月15日...
    茶点故事阅读 37,846评论 3 336
  • 正文 我和宋清朗相恋三年,在试婚纱的时候发现自己被绿了。 大学时的朋友给我发了我未婚夫和他白月光在一起吃饭的照片。...
    茶点故事阅读 39,965评论 1 348
  • 序言:一个原本活蹦乱跳的男人离奇死亡,死状恐怖,灵堂内的尸体忽然破棺而出,到底是诈尸还是另有隐情,我是刑警宁泽,带...
    沈念sama阅读 35,684评论 5 347
  • 正文 年R本政府宣布,位于F岛的核电站,受9级特大地震影响,放射性物质发生泄漏。R本人自食恶果不足惜,却给世界环境...
    茶点故事阅读 41,295评论 3 329
  • 文/蒙蒙 一、第九天 我趴在偏房一处隐蔽的房顶上张望。 院中可真热闹,春花似锦、人声如沸。这庄子的主人今日做“春日...
    开封第一讲书人阅读 31,894评论 0 22
  • 文/苍兰香墨 我抬头看了看天上的太阳。三九已至,却和暖如春,着一层夹袄步出监牢的瞬间,已是汗流浃背。 一阵脚步声响...
    开封第一讲书人阅读 33,012评论 1 269
  • 我被黑心中介骗来泰国打工, 没想到刚下飞机就差点儿被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留,地道东北人。 一个月前我还...
    沈念sama阅读 48,126评论 3 370
  • 正文 我出身青楼,却偏偏与公主长得像,于是被迫代替她去往敌国和亲。 传闻我的和亲对象是个残疾皇子,可洞房花烛夜当晚...
    茶点故事阅读 44,914评论 2 355