HISAT2 通过购买腾讯云服务器(计时)构建索引(--snp --haplotype --ss --exon)

If you use --snp, --ss, and/or --exon, hisat2-build will need about 200GB RAM for the human genome size as index building involves a graph construction. Otherwise, you will be able to build an index on your desktop with 8GB RAM.

HISAT2构建索引需要200g内存,没办法要与时俱进匹配其它软件,包小时租用一个服务器吧

腾讯云,不错的选择!!计费模式,按量计费

棒棒的,用起来!

wget ftp://ftp.ccb.jhu.edu/pub/infphilo/hisat2/downloads/hisat2-2.1.0-Linux_x86_64.zip //下载hisat2

unzip 解压即可使用。

下载 ref,gtf,snp

ftp://ftp.ensembl.org/pub/release-96/fasta/homo_sapiens/dna/Homo_sapiens.GRCh38.dna.primary_assembly.fa.gz

http://hgdownload.cse.ucsc.edu/goldenPath/hg38/database/snp151Common.txt.gz

ftp://ftp.ensembl.org/pub/release-96/gtf/homo_sapiens/Homo_sapiens.GRCh38.96.gtf.gz

步骤(参照官网下载的索引中的):

1. hisat2_extract_snps_haplotypes_UCSC.py Homo_sapiens.GRCh38.dna.primary_assembly.fa snp151Common.txt genome //产生genome.haplotype genome.snp文件

此处snp151Common.txt染色体名称使用的是,例如chr1,而GRCh38.fa使用的是1,需要修改snp文件的染色体名称,利用如下shell脚本更新

SNP_FILE=snp151Common.txt

awk 'BEGIN{OFS="\t"} {if($2 ~ /^chr/) {$2 = substr($2, 4)}; if($2 == "M") {$2 = "MT"} print}' ${SNP_FILE} > ${SNP_FILE}.tmp

mv ${SNP_FILE}.tmp ${SNP_FILE}


2. hisat2_extract_splice_sites.py Homo_sapiens.GRCh38.96.gtf > genome.ss

3. hisat2_extract_exons.py Homo_sapiens.GRCh38.96.gtf > genome.exon

4. hisat2-build -p 20 Homo_sapiens.GRCh38.dna.primary_assembly.fa --snp genome.snp --haplotype genome.haplotype --ss genome.ss --exon genome.exon genome_snp_tran

前三步骤,可以在本地做完,再把4个genome文件,还有基因组ref上传到服务器上,毕竟时间就是金钱。

搞定,过程图


其中genome_snp_tran.1-8.ht2就是要的索引了

总共用时,1个半小时,外加上下考数据1个半小时,所以买个4小时肯定够了!

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