大家好，我叫杨俊伟，现就读于中国农业大学，在读博士，主要从事生物信息学方面工作。<br><br>人生格言：Take pains, be perfect
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目前，常用于丝状真菌基因敲除的筛选标记主要为 G418遗传霉素（Geneticin） 和潮霉素（Hygromycin B）。G418 是一种氨基糖苷类抗生素。在分子遗传试验中...
▲文献（Literature）：是记录有知识的一切载体。构成文献的三个要素：文献要有知识内容；文献要有物质载体；文献要通过一定的方式被记载下来。—《文献著录总则》▲知识（Kn...
膜蛋白分析：生物膜所含的蛋白叫膜蛋白，是生物膜功能的主要承担者。生物体大约30%蛋白质都是膜蛋白，而膜蛋白是药物的主要靶标。许多膜蛋白是兼性分子，它们的多肽链可以横穿膜一次或...
▲蛋白质性质和结构分析：序列相似的蛋白质具有相似的三维结构不同蛋白质中相同的结构域（domain）具有相似的功能▲分析蛋白质的功能：一级结构：氨基酸的排列顺序；二级结构（se...
预测蛋白质结构域（Conserved Domains）在线分析工具：◆ NCBI Conserved Domains：http://www.ncbi.nlm.nih.gov/...
刻意练习（deliberate practice）---- 如何从新手到大师▲ 刻意练习即 既有目的，又获得指导的练习。▲ 有目的的练习的四个特点⑴ 具有定义明确的特定目标⑵...
PCR引物设计⑴ 确定PCR产物片段大小（product length）；⑵ 确定引物所在区段；⑶ 确定引物序列的长度范围（primer length ）；⑷ 确定引物Tm值...
转化子与非转化子：感受态细胞中是否带有质粒？重组子与非重组子：感受态细胞中是否带有重组质粒？目的重组子与非目的重组子：重组质粒中的目的基因是否正确？假阳性转化子：只接受了载体...
利用ClonExpress®II One Step Cloning Kit 非连接酶依赖型单片段快速克隆试剂盒 ClonExpress®技术是一种高效的 DNA 无缝克隆技术...
总结昨天胶回收失败的一天，想好点样的顺序，开始实验之前一定要仔细研究胶回收试剂盒说明书，准备好试验过程中要用到的东西，做到心中有数。停止怀疑自己是实验成功的关键。 Steps...
科研这条道路是一条道阻且长的路，感谢Zxy师哥对我小论文实验的指导和帮助，感谢Ph师姐、梅子带我入门分子生物学基因敲除试验，在跟她俩做试验的过程中提高了我时间管理能力、对实验...
质粒提取原理 从细菌中分离质粒DNA的方法包括三个基本步骤：培养细菌使质粒扩增，收集和裂解细胞，分离和纯化质粒DNA。当用强碱处理时，细菌的线性染色体DNA变性，而共价闭合环...
农杆菌（Agrobacterium tumefaciens，A.tumefaciens）感受态的制备 Prepare:配利福平Rif抗生素（0.5g+10ml DMSO，0....
Prepare：提前打开制冰机，白枪头和蓝枪头灭菌200μLEHA105感受态细胞，LB液体+LB固体培养基，液氮，37℃水浴锅4000r/min 离心机，28℃恒温培养箱
prepare：LB液体培养基IM（Induction Medium）液体 & 固体培养基CYA（Czapek yeast extract agar medium）固体培养基...
Tm=Melting Temperature （溶解温度）天然状态的DNA，在比较高的温度下（70-90℃）会发生变性，这时，双螺旋解开为单链，并变成无规则线团。在光学性质上...
转化子的遗传稳定性的确定是通过将转化子连续继代五代甚至更多代以后，观察其是否具有潮霉素B抗性，且通过PCR检测是否仍然可以扩出相应大小的潮霉素磷酸转移酶基因片段。 实验结果 ...
用目的基因的CDS序列设计定量引物。 1、qPCR引物设计原则： 产物长度80-120bp，80-150bp最佳 引物长度18-25nt，F引物和R引物差别尽量不大于3bp ...
一、核酸 核酸本质上是由3'，5'-磷酸二酯键连接的dNTP多聚核苷酸长链组成。根据核苷酸的不同核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）。核酸提取过程中经常涉及到的...